Objectif. L’objectif principal de cette étude était de comparer en conditions réelles d’utilisation l’efficacité d’un détergent désinfectant associant l’acide peracétique, le chlorure d’ammonium quaternaire et des tensioactifs (Oxy’Floor® des laboratoires Anios) à celle de l’eau de Javel 0,5 % pour la réduction de la contamination environnementale par les spores de Clostridium difficile. Méthode. Une étude prospective de type « avant-après » en cross-over multiple a été réalisée pendant un an à l’hôpital Saint-Antoine dans les services de gastro-entérologie et de maladies infectieuses. Des prélèvements d’environnement (12 prélèvements de surfaces, 2 prélèvements d’air, 1 prélèvement de siphon) ont été réalisés dans la chambre des patients infectés par C. difficile avant et après bionettoyage au moment du diagnostic (J0), à J1, J2, entre J7 et J10, et à la sortie du patient. Résultats. Quarante patients ont été inclus : 14 chambres ont été désinfectées à l’eau de Javel et 26 avec de l’Oxy’Floor®. Au total, 4 441 prélèvements d’environnement ont été réalisés. Le taux global de contamination par C. difficile était de 11,32 % avant bionettoyage et de 6,29 % après. La réduction de la contamination était significative avec l’eau de Javel 0,5 % (réduction relative de 44,55 %, p = 0,0005) et avec l’Oxy’Floor® (réduction relative de 44,35 %, p < 0,0001). En revanche, la satisfaction globale des utilisateurs allait en faveur de l’Oxy’Floor® en raison de sa simplicité d’utilisation (p < 0.001).